单克隆细胞株在生物制药中的重要性

单克隆细胞株的开发在生物制药生产，尤其是单克隆抗体的制备中扮演着至关重要的角色。为了确保产品的一致性，所使用的细胞株必须来源于单个细胞。常见的克隆工作流程通常包含一至两轮的单细胞克隆，然后通过孔板成像确认单细胞是否成功分配。

传统方法的局限性

然而，传统的有限稀释法或流式细胞术等方法常常无法有效验证是否仅分配了单个细胞，这使得单克隆性的确认过于依赖孔板成像的准确性。孔板成像在细胞检测时存在固有误差，还需依赖离心操作以确保所有细胞位于成像焦平面内。这些误差的累积降低了在特定工作流程中实现单克隆性的可能性，因此高精度的成像技术和检测方法显得尤为重要。

尊龙凯时的UPSIGHT20系统

尊龙凯时的UPSIGHT20（影像式单细胞打印与成像系统）通过双重验证机制，有效解决了细胞分配中的挑战。该系统采纳两种验证方式：首次通过喷嘴成像记录单细胞的分离情况，其次采用3D全孔成像技术直接捕获液体体积的图像。此3D成像技术能够全面捕捉液体体积，从而避免克隆后所需的离心操作。

此外，UPSIGHT20还支持菌落生长后的实时监测，兼容96、384和1536孔板，非常适合高通量工作流程，并且单细胞分配效率超过98%。通过对4000个单细胞和近1000个生长菌落的深入分析，结果表明，结合喷嘴图像与3D全孔成像，细胞株的单克隆性概率超过9999%，且无需依赖荧光染色或成像技术。

完整的工作流程

UPSIGHT20为克隆、克隆验证和追踪提供了完整的工作流程。该流程的第一步是将细胞悬浮液加载到设备中的一次性墨盒中。在单细胞分配过程中，喷嘴会生成微型自由飞行液滴，并持续进行成像。图像处理算法实时评估即将到来的液滴，以判断其是否包含0、1或多个细胞。如果液滴被判定为包含0或多个细胞，或尽管只含一个细胞但其特征不符合预设标准，则该液滴将被丢弃。相反，若检测到一个单细胞，并且其特征符合标准，则该细胞会被成功分配至孔板中。

在成功分配的情况下，系统会生成多张图像以确认单细胞的分离与排出情况。分配完成后，使用孔板下方的相机进行3D全孔成像，以捕获孔中的一系列图像，为目标孔中分配的单细胞提供二次确认。这种3D成像方式消除了对孔板进行离心的需求，极大提高了细胞检测的准确性。

高效的成像过程

在克隆后阶段，UPSIGHT20能够对具有理想生长曲线的特定克隆进行成像并追踪其群体生长。整个成像过程快速高效，仅需约3分钟即可处理一个384孔的板，极大实现了高通量的群体追踪。

双重验证机制的优势

结合喷嘴图像与3D全孔成像，UPSIGHT20为单克隆细胞分配提供了强有力的验证，单细胞分配效率超过98%。虽然算法在某些情况下有误判，但3D全孔成像则为单细胞分配的确认提供了第二种方法，确保仅有一个细胞被分配。

结论

尊龙凯时的UPSIGHT20是一种功能强大的设备，具备单细胞的分离、验证与菌落生长监测能力。创新的3D全孔成像技术为每个孔提供全面的液体体积成像，大大提升了实验的灵活性和准确性。通过对单细胞的成像与记录，UPSIGHT20为克隆性验证提供了可靠的双重保障，实验证明单克隆率超过9999%。此外，成像速度显著提高，进一步增强了实验的效率与可靠性。总的来说，UPSIGHT20不仅提升了单细胞研究的准确性和效率，更为未来的细胞生物学研究提供了强而有力的技术支持。