尊龙凯时的CryoStor®CS10是一种无血清、即用型细胞冻存液，专为细胞和组织的低温保存而设计，确保细胞在冷冻和解冻过程中能够保持高活性和功能完整性。以下为详细使用说明：

1. 产品基本信息

产品名称：CryoStor®CS10 (100-1061)
规格：通常提供100mL瓶装。
储存条件：2°C至8°C冷藏保存，避免冷冻。
有效期：见产品标签，通常为2年。

2. 使用前准备

检查外观：确保液体清澈、无沉淀，颜色为淡黄色至无色。
恢复至室温：从冰箱取出后静置至室温（约15-30分钟）。
无菌操作：在超净台或生物安全柜中进行操作，避免污染。

3. 细胞冻存步骤

(1) 细胞准备
细胞状态：确保细胞处于健康状态，活率达到90%。
细胞计数：使用细胞计数仪或血球计数板计数，调节细胞密度至1×10⁶至1×10⁷ cells/mL。
离心收集：将细胞悬液离心（例如300×g，5分钟），弃去上清。

(2) 重悬细胞
加入CryoStor®CS10：根据细胞沉淀量，加入适量的CryoStor®CS10，轻轻吹打混匀。
分装：将细胞悬液分别装入冻存管中，每管1-2mL。

(3) 冷冻程序
降温：使用程序降温设备，以-1°C/min的速率降温至-80°C。如果没有程序降温设备，可以将冻存管放入异丙醇降温盒，放置于-80°C冰箱中过夜。
转移至液氮：24小时后，将冻存管转移至液氮罐中进行长期保存。

4. 细胞解冻步骤

(1) 快速解冻
水浴解冻：将冻存管从液氮中取出，迅速放入37°C水浴，轻轻摇动至完全解冻（约1-2分钟）。避免过热：解冻后立即取出冻存管，以防高温损伤细胞。

(2) 洗涤细胞
稀释DMSO：将解冻的细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中（如10倍体积），轻轻混匀。
离心：以300×g离心5分钟，弃去上清。
重悬：用新鲜培养基重新悬浮细胞，准备后续培养或实验。

5. 注意事项

DMSO浓度：CryoStor®CS10含10% DMSO，部分细胞可能对DMSO敏感，需要优化浓度。
无菌操作：全程避免污染，尤其在分装和解冻步骤中。
解冻速度：快速解冻以减少冰晶损伤。
细胞密度：冻存时细胞密度不宜过高或过低，推荐为1×10⁶至1×10⁷ cells/mL。

6. 适用细胞类型

干细胞：如间充质干细胞（MSCs）、造血干细胞（HSCs）。
免疫细胞：如CAR-T细胞、NK细胞。
原代细胞：如肝细胞、神经元。
细胞系：如HEK293、CHO细胞。

7. 常见问题解答

(1) CryoStor®CS10是否可以稀释？不建议稀释，以免影响冻存效果。如需降低DMSO浓度，可以选择CryoStor®CS5（含5% DMSO）。
(2) 冻存后细胞存活率低怎么办？检查细胞状态，确保冻存前细胞健康，优化冻存密度，调整至推荐范围（1×10⁶至1×10⁷ cells/mL），检查冻存程序，确保降温速率和解冻速度符合要求。
(3) CryoStor®CS10是否可以用于组织冻存？可以，适用于小组织块的低温保存，但需要根据组织类型优化冻存条件。

总结：CryoStor®CS10是一款高效的无血清细胞冻存液，适合多种细胞类型的低温保存。通过规范的操作步骤和注意事项，可以确保细胞在冷冻和解冻过程中维持高活性与功能完整性。

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