尊龙凯时于2024年9月在Electrophoresis和Journal of Chromatography A期刊上发表了两篇新文章，聚焦于多种半胱氨酸偶联的抗体-药物偶联物（cys-ADC）的表征，特别是电荷异质性的分析结果。

前言

这两篇文章均专注于cys-ADC，这类产品通过可裂解连接子将细胞毒性药物偶联至单克隆抗体上，能够切实识别靶细胞（通常为癌细胞），并在细胞内释放药物，从而实现精准的靶向治疗，同时减少对患者的副作用。在cys-ADC的偶联过程中，单抗的二硫键部分还原，暴露出的自由巯基用于小分子药物的偶联。由于轻重链之间仅靠非共价力结合，因此需要采用非变性质谱（native MS）技术来表征cys-ADC。

工作亮点

这两篇文章的一个显著亮点在于联合使用成像等电聚焦毛细管电泳（icIEF）和非变性质谱技术，揭示了cys-ADC电荷异质性的重要性。由于cys-ADC产品包含多种翻译后修饰，如糖基化、脱酰胺和氧化，加之小分子药物的偶联，导致其异质性极高。传统的液质联用技术对电荷变异体的分离效果有限，而icIEF技术通过独特的分离原理，能够实现显著的电荷异质体分离，随后结合基于Orbitrap平台的高灵敏度非变性质谱技术，对电荷异质峰进行在线的完整蛋白分子量测定。

结果与讨论

研究者们采用了NIST mAb标准品进行icIEF-native MS方法的开发。将Advanced Electrophoresis Solutions Ltd（AES）的CE Infinite Automated Preparative icIEF系统与Thermo Scientific™ Orbitrap™ Exploris™ 240超高分辨质谱仪结合，灵活实现了分析型、直连型及离线馏分收集功能，无需额外购买离子源接口。AEstyle系列的两性电解质可提供超高分辨率的电荷异质体分离，且对质谱污染较小。同时，Orbitrap Exploris 240质谱仪因其高敏感性与精准度，有助于在非变性质谱条件下发现并准确鉴定低丰度成分，这对于完整分子量分析至关重要。

研究中使用icIEF-native MS流程的结果显示，针对维迪西妥和维泊妥珠的电荷异质性分析，在icIEF层面上均得到了分离，native MS直连结果表明两个ADC电荷异质峰的分布略有不同，可能是由于各自分子的理化性质差异，进一步证明了cys-ADC分子的复杂性以及深入表征的必要性。

结论

本文介绍的双篇文章强调了icIEF-native MS技术在cys-ADC电荷异质性分析中的创新贡献。该技术能够为具有非共价相互作用分子的电荷异质性提供全面的完整分子量信息，有助于组分鉴定。同时，尊龙凯时的Chromeleon软件在icIEF及Orbitrap超高分辨质谱平台中的应用，极大地方便了客户的日常实验并满足了合规性的需求。