在细胞培养过程中，通过将培养基中的血清（FBS）浓度降低至0-1%，可以让细胞从“自助餐”模式切换到“轻断食”状态。这种做法的最大好处在于，血清中的生长因子被去掉后，细胞会在G0/G1期停滞，仿佛被按下了暂停键，后续实验操作将变得更加灵活。

1. 同步周期，告别细胞不同步

为了避免因为细胞不同步而导致的数据波动，可以在饥饿12-24小时后观察结果。这样做可以让90%以上的细胞同步停留在G0/G1期，且在测定CyclinD1和p27等周期蛋白时，结果会显著提高。

2. 激活凋亡与自噬

在研究应激的过程中，去掉血清可以促使细胞启动“自救模式”。此时，Caspase-3的活性会显著上升，同时LC3-II斑点也会大量增加，为研究抗癌药物或自噬诱导剂提供了理想的实验模型。

3. 提高转染效率

当细胞在低营养状态下生长时，它们的代谢速率减慢，外源性DNA/RNA更易于进入细胞内。以HEK293T细胞为例，在饥饿一晚后，转染效率可从30%提升至80%，即使是难以处理的悬浮细胞也能得心应手。

4. 清除信号通路背景

血清中的生长因子常常会污染信号通路的分析。通过将细胞提前饥饿12小时，可以有效清除这些背景干扰。随即施加EGF或胰岛素刺激后，p-ERK与p-AKT的磷酸化水平将会显著区分。

5. 模拟体内微环境

在肿瘤或干细胞研究中，模拟低营养和低氧环境变得尤为重要。可通过使用0.5%血清来复制这些条件，使得癌细胞的糖酵解活性增强，干细胞的特性得到良好的保持。

操作步骤

1. 预处理：待细胞生长至70-80%汇合时，使用PBS轻柔洗涤两遍，以去除任何残留的血清成分。

2. 饥饿：更换为0-1%血清的培养基，确保贴壁细胞静置，而悬浮细胞则降低转速以防沉淀。

3. 唤醒：实验前再加入正常血清，使细胞迅速恢复生机，以便后续的转染或药物添加能够顺利进行。

运用尊龙凯时的细胞培养技术，使得实验操作更加高效便捷，助你在生物医疗研究中取得更佳的成果。